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技术

2023免疫突触：方法和协议

研究扩散动力学和相互作用扫描荧光相关光谱 (sFCS)

作者：

Alexander M. Mørch 和 Falk Schneider

关键词：

扩散动力学、FF、sFCS、寡聚化、相互作用

摘要：

免疫细胞的激活和免疫细胞的形成免疫突触（IS）严重依赖质膜的重组。这些高度协调的过程是由扩散和低聚动力学以及单分子相互作用驱动的。虽然通过传统成像可以观察到组织中缓慢的宏观和中观尺度变化，但传统方法常常会错过快速的纳米尺度动态，但解决它们对于理解潜在的生物机制至关重要。在这里，我们描述了使用扫描荧光相关光谱 (sFCS) 和扫描荧光互相关光谱 (sFCCS) 来研究 IS 形成和其他生物环境中分子扩散动力学和相互作用的重组和变化。我们专注于测量的实际方面，包括光学设置的校准和对准，提出执行测量的全面协议，并提供数据分析管道和策略。最后，我们展示了该技术在 T 细胞信号传导过程中研究 Lck 扩散的示例性应用。

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